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線粒體提取試劑盒 NobleRyder P0940；蘭州供應(yīng)線粒體提取試劑盒 NobleRyder

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• 更新時間：2024-08-28
• 廠家性質(zhì)：經(jīng)銷商

北京諾博萊德科技有限公司供應(yīng)線粒體提取試劑盒 NobleRyder P0940量大優(yōu)惠，咨詢 ：

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線粒體提取試劑盒使用說明

 一，試劑盒組份

二，說明

線粒體提取試劑盒用于從動物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的線粒體。適合于動物軟組織（肝或腦組織）和硬組織（肌肉）以及培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高，可以被用于細(xì)胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。

三，操作步驟

1. 樣本處理

a. 組織勻漿：稱取100~200 mg新鮮組織如肝臟、腦、心肌等，PBS或生理鹽水沖洗，洗凈血水，濾紙吸干，用剪刀剪為碎塊放入小容量玻璃勻漿器內(nèi)。加入1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer，0℃冰浴上下研磨組織20次；

b. 培養(yǎng)細(xì)胞勻漿：消化細(xì)胞，PBS洗滌，800 × g 5~10 min離心收集細(xì)胞。計數(shù)。每次提取需要5 × 10⁷個細(xì)胞，加入1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到小容量玻璃勻漿器內(nèi)，0℃冰浴研磨30~40次；

2. 將組織或細(xì)胞勻漿物轉(zhuǎn)移到離心管，4℃，1000× g 離心5 min；

3. 取上清，加入一新的離心管中，4℃，1000× g 再次離心5 min。

4．取上清，加入一新的離心管中，4℃， 12,000 × g 離心10 min。離心后的上清含胞漿成分，可從中提取胞漿蛋白。將上清轉(zhuǎn)移到新離心管，線粒體沉淀在管底；

5. 在線粒體沉淀中加入0.5 mL  Wash Buffer重懸線粒體沉淀，4℃，1000× g 離心5 min；

6．取上清，加入一新的離心管中，4℃， 12,000 × g 離心10 min。棄上清，高純度的線粒體沉淀在管底；

6. 用50 -100μL Store Buffer 或合適的反應(yīng)緩沖液重懸線粒體沉淀，立即使用或-70℃保存。

四 注意事項：
1. 為保證獲得完整的線粒體，*是全程低溫操作。第二是快速。第三，在不破壞亞細(xì)胞器的情況下破碎細(xì)胞是制備線粒體的zui關(guān)鍵環(huán)節(jié)。與組織塊相比，培養(yǎng)細(xì)胞特別是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞在用玻璃勻漿器勻漿時較難破壁，因而要選用小容量玻璃勻漿器、間隙嚴(yán)密的研杵上下研磨培養(yǎng)細(xì)胞。
2. 以離心力g計算正確的離心速度，不同的離心機(jī)可據(jù)此精確計算離心速度。
3. 進(jìn)行Western Blot和2D-膠電泳，可直接加入上樣緩沖液裂解線粒體。

五 儲存：四周內(nèi)使用可4℃儲存，長期置-20℃

轉(zhuǎn)速與離心力換算

G＝1.11×（10^-5）×R×[rpm]^２
G為離心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍數(shù)來表示；

 [rpm] ^２即：轉(zhuǎn)速的平方； R為半徑，單位為厘米。

 北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū)，是一家專業(yè)從事生化試劑、分子生物學(xué)試劑、實驗耗材及實驗儀器研發(fā)、銷售、服務(wù)為一體的生物科技公司，公司主要經(jīng)營的進(jìn)口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas（MBI）, NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等；產(chǎn)品涉及化工原料、生化試劑、分子克隆相關(guān)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)及檢測常用試劑、實驗室常用耗材及儀器。

線粒體提取試劑盒 NobleRyder P0940

線粒體提取試劑盒 NobleRyder P0940